При выживании КЭ не меньше чем в четырех слепых пассажах и при отрицательных микроскопических исследованиях считают, что материал не содержит вируса из группы ОЛТ (бедзоний). При гибели куриных эмбрионов и положительных результатах микроскопии проводят идентификацию вируса.

Антиген готовят из вируссодержащего материала желточных мешков КЭ в такой последовательности:

1)            гомогенизируют материал в ступке или гемогенизаторе, добавляя физиологический раствор, содержащий 0,5% формалина (до получения приблизительно 10%ной суспензии);

2)            выдерживают суспензию в рефрижераторе при температуре 2—4°С в течение 2 дней;

3)            центрифугируют при 15 000 обмин в течение 1 ч;

4)            надосадочную жидкость удаляют, осадок ресуспендируют в физиологическом растворе с 0,2% формалина до половины исходного объема;

5)            в склянке с хорошо притертой крышкой суспензию смешивают с б объема эфира, встряхивают и ставят на 10—12 ч в холодильник;

6)            после оттаивания водный слой отделяют от эфира и дважды центрифугируют при 15 000 обмин в течение 1 ч. Осадок ресуспендируют до б исходного объема;

7)            готовый антиген центрифугируют при 2000 обмин (осаждение грубых частиц) и титруют;

8)            для титрования антигена используют минимум две сыворотки с высоким титром (1: 160), две сыворотки с низким титром (1: 20) и 2—3 сыворотки достоверно негативные.

Приготовление иммунной сыворотки. Суспензию, приготовленную из вируссодержащего материала желточных мешков КЭ, вводят по 0,5—2 мл внутрибрюшинно морским свинкам, заранее обследованным серологически. Титр антител определяют со специфическим антигеном, приготовленным из органов мышей. Антиген, полученный из желточных мешков, применять нельзя.