Микроскопия спермы животных

Микроскопия фиксированных препаратов микроорганизмов в окрашенном виде. Для приготовления тонких мазков применяют обезжиренные стекла. Техника приготовления мазков зависит от характера исследуемого материала. Мазки из микробных культур с жидкой питательной средой готовят аналогично мазкам из крови или петлей делают круговые движения и равномерно распределяют материал в виде кружка с копеечную монету. Если мазки готовят из вязкого материала (секрета добавочных половых желез, гнойного экссудата половых органов), каплю материала на предметном стекле распределяют шлифованным предметным стеклом.

Приготовленные препараты высушивают, фиксируют и окрашивают растворами красок или красящей бумагой. Применяют сложную и простую окраску. При простой окраске используют одну какую-либо краску (спиртоводный раствор фуксин Пфейфера 1: 10, метиленовую синь по Леффлеру, сафранин). Кислую краску эозин применяют только для окрашивания протоплазмы клетки и фона. Кислый фуксин непригоден.

Многие микробы принимают краски легко и быстро. Если микробы окрашиваются с трудом, повышают их красящие способности (мазок нагревают на пламени спиртовки до кипения краски), удлиняют срок окрашивания и действуют протравами (вещества, облегчающие проникновение краски внутрь клетки). Для этого мазок обрабатывают фенолом, танином, уксусной и хромовой кислотами, щелочами и др. Протравы действуют в одних случаях на краски, в других — на способность клеток к восприятию краски. Протравами обрабатывают мазок до нанесения краски (при окраске жгутиков) вместе с краской (фенол в фуксине Циля) или после воздействия краски (люголевский раствор при окраске по 1 раму).

Для удаления краски применяют обесцвечивающие вещества: спирт, 5%-ный водный раствор серной кислоты, 3 оный раствор соляной кислоты в абсолютном алкоголе, 20—30%-ный водный раствор азотной кислоты и др.

При простом методе окрашивания краску наносят на мазок, выдерживают необходимое время (фуксин 1: 10— 10—30 мин, метиленовую синь — 2—10 мин), смывают краску дистиллированной водой и мазок обсушивают фильтровальной бумагой. Если применяют кедровое масло, мазок должен быть совершенно сухим, так как оставшаяся влага с маслом образует эмульсию, которая мешает микроскопии.

В последнее время широко применяются красящие бумаги, предложенные А. И. Синевым.