Для выделения и поддержания микоплазм применяют жидкие, полужидкие и твердые питательные среды, приготовленные с применением отвара из сердца крупного рогатого скота или пептона Мартена. В качестве дополнительных факторов питания и роста применяют сыворотку крови лошади или свиньи и дрожжевой экстракт. Из жидких питательных сред показаны среда Эдварда, Турнера, модифицированная среда ВИЭВ и Йуртманова. Из плотных питательных сред наиболее часто употребляют 1,5—2%-ный агар, приготовленный на среде Эдварда или 1,5%-ный агар, приготовленный по специальной прописи и технологии.

Подготовка спермы к посеву. Цельную сперму разбавляют 1:9, сохраненную 1: 3 или 1: 6 (с учетом степени разбавления спермы перед хранением) жидкой средой, к которой добавляют раствор пенициллина из расчета 100—1000 ЕДмл и раствор уксуснокислого таллия в концентрации 1: 2000 (от 1: 1500 до 1: 3000). Выдерживают при комнатной температуре (20—25°С), после чего высевают на питательные среды. Для освобождения от бактерий и других примесей разбавленную сперму перед посевом центрифугируют при 2000—3000 обмин 10—15 мин и фильтруют через СФ Зейтца.