П. 29 — штамм вируса клещевого энцефалита, выделенный в 1961 г. из клещей I. pers. и прошедший два пассажа через мозг мышей.
Штамм омской геморрагической лихорадки К-ва, поддерживаемый мозговыми пассажами на мышах.
Все выбранные штаммы характеризовались высокой патогенностью для мышей при внутримозговом их заражении (lgLD50>7,5/0,03 мл).
Для первичного инфицирования тканевых культур использовалась 10% мозговая суспензия (0,1 мл на пробирку). Инокулятом для последующих пассажей служила культуральная жидкость предыдущего пассажа (100 цитопатогенных доз, если регистрировалось цитопатическое действие; при отсутствии цитопатического эффекта — цельная культуральная жидкость). В каждом пассаже культуральная жидкость титровалась по цитопатогенному действию.
Перед внесением вируссодержащего материала в культуру среда роста удалялась и заменялась после внесения инокулята средой 199 на растворе Хэнкса (рН 7,15) с нормальной бычьей сывороткой в количестве 5—10%-
Инфицированные культуры микроскопировались ежедневно до 7-го дня инкубации при 37° для регистрации цитопатического действия. Помимо того, наличие вируса в культуральной жидкости контролировалось биологической пробой на мышах как в опытах, где отмечалось ЦПД, так и при отсутствии последнего.
Специфичность цитопатического действия подтверждалась нейтрализацией его клещевым гамма-глобулином и соответствующей гомологичной сывороткой. Степень цитопатической активности выражали титрами тканевых цитопатогенных доз, вычисленными по методу Рида и Менча (lg ТЦД50).
