Тканевые культуры. В работе были использованы культуры почек эмбриона свиньи, трипсинизация которых проводилась по общепринятой методике. Клетки в концентрации 800 ООО в 1 мл выращивали в среде, состоящей из 0,5% гидролизата лактальбумина в растворе Хэнкса (60%), коровьей амниотической жидкости (30%) и нормальной бычьей сыворотки (10%) с антибиотиками (пенициллина 100 ед/мл и стрептомицина 50 ед/мл).

Вирус. Исследования проводили со штаммом Хаб-17 вируса весенне-летнего клещевого энцефалита, адаптированным к мозговой ткани белых мышей.

Заражение культур в пробирках или 100-граммовых матрацах производили вируссодержащей суспензией мозговой ткани мышей в разведении 10~2—10~3 в объеме 0,2 мл на пробирку или 1 мл на матрац. Титр инокулята соответствовал 5,5—6,5 lg ЛДбоДпл. После заражения культур использовали среду 199 с антибиотиками и 5% бычьей сыворотки или без нее. Наблюдение за культурами вели в течение 7—9 дней.

Для выявления гемагглютининов пробы культураль-ной жидкости центрифугировали при 1500—2000 обмин в течение 10 минут для освобождения от клеток и до постановки РГА хранили при +4°.

Постановку реакции гемагглютинации и подавления гемагглютинации осуществляли по методике, описанной для мозгового антигена вируса клещевого энцефалита (Casals, Е. Н. Левкович). Использовали 0,33% взвесь гусиных эритроцитов на фосфатном буферном растворе с различными значениями рН (от 6,0 до 7,2) и боратный буфер рН 9,0 для разведения культурального антигена. Оптимальные условия для выявления гемагглютининов создавались при использовании фосфатного буфера рН 6,3—6,4. Реакции ставили при +4°.