Применяемые ныне режимы инактивации вируса клещевого энцефалита при получении вакцин имеют существенные недостатки. В случае инактивации при +37° вакцины часто оказываются неиммуногенными; в то же время режим инактивации при +4° является длительным и, по-видимому, не всегда обеспечивает получение безопасных препаратов. Все это побудило нас изыскать более приемлемый метод инактивации формалином при +37°.

Материалы и методы

В качестве инфицирующего материала для заражения культур ткани использовались свежеприготовленные эмульсии мозга мышей или куриных эмбрионов, инфицированных штаммом Пан (1 мл 10~2 на 100—150 мл среды).

Однослойные культуры ткани трипсинизированных 9—10-дневных куриных эмбрионов или почек эмбрионов свиньи получали по общепринятой методике. В качестве среды для выращивания клеток использовали 0,5% раствор гидролизата лактальбумина в растворе Эрля с добавлением 3% бычьей сыворотки.

После заражения культуры заливались средой 199 без сыворотки. Через 96—120 часов инкубации при +37° проводили инактивацию вируса формалином. Для вакцины использовались культуральные вирусы с титром 10~6 и больше.

Первые опыты показали, что вирус клещевого энцефалита, полученный в культуре ткани куриных эмбрионов в среде 199 без добавления сыворотки или других стабилизаторов, весьма нестоек и почти полностью разрушается при температуре +37° в течение 12 часов. Это позволило нам высказать предположение, что в случае инактивации при 37° тепловая денатурация инфекционного агента может наступить ранее воздействия формалина и стабилизации им антигенных свойств вируса.

При температуре +37° через 24 часа инактивации вирус не обнаруживался как при воздействии формалина, так и без него.

При более низких температурах процесс инактивации вируса протекал значительно медленнее. Для сохранения антигенных свойств вируса в процессе воздействия формалина при этих температурах имеются, по-видимому, более благоприятные условия, однако в процессе инактивации формалином при +4° в литературе отмечено выделение вируса через 36 суток (Е. Н. Левкович).