Гемагглютинирующие свойства вируса клещевого энцефалита подробно были изучены А. Сальминен (1960), С. А. Ананян и Г. П. Пивановой (1960). Большинство исследователей, занимавшихся разработкой этой реакции, применяли активный вирус. Но имеются указания на возможность использования инактивированного антигена. С. А. Ананян и Г. П. Ливанова (1960) предлагают обезвреживать вирус ультрафиолетовыми лучами, А. Сальминен (1960) —десятидневным воздействием протаминсульфата при 37° и рН 9,0, Л. Л. Фадеева и А. П. Пырикова (1961)—фотодинамическим действием метиленовой синьки (концентрация 106 +150 ватт) в течение 20 минут, Б. Ф. Семенов и А. И. Резепова (1961) — бета-пропиолактоном.

Нами (С. П. Карпов и А. А. Селезнева) РЗГА ставилась с антигеном, изготовленным по методу Казалса и Броуна из вирусной суспензии мозга белых мышей-сосунков (в дальнейшем — мышей весом до 8 г), пятикратно обработанной ацетоном и эфиром и экстрагированной боратно-солевым раствором рН 9,0. Антиген имел гемаг-глютинационный титр от 1 : 640 до 1 : 2560, в зависимости от серии. В реакции применяли 4 гемагглютинирующие единицы антигена.

С целью удаления из исследуемых сывороток неспецифических ингибиторов и нормальных гемагглютининов они обрабатывались каолином и эритроцитами гуся. Применявшийся нами сухой каолин имел объемную емкость 10,24, рН 7,2.

Специальные исследования для определения степени адсорбции ингибиторов 25% каолином, проведенные нами с сыворотками 68 больных различными лихорадочными заболеваниями, показали, что в 19,1% сывороток (7,4% в титре 1 : 20; 7,4% — 1 : 40; 2,9% — 1 : 80 и 1,4% — 1 : 160) ингибиторы  остаются  неизвлеченными.

Эти материалы говорят о том, что при использовании каолина для извлечения ингибиторов сыворотки в титре до 1:160 могут давать в определенном проценте неспецифические положительные результаты.

При использовании РЗГА с целью диагностики клещевого энцефалита следует учитывать результаты с разведения сыворотки 1 : 80 и выше. В этом случае ошибка может быть максимальной в 4,3% случаев.