Штаммовые антигены готовились из ткани мозга зараженных белых мышей, нормальные антигены приготовлялись аналогично из ткани мозга незараженных белых мышей. Для получения высокодисперсной суспензии ткань мозга мышей растиралась в ступке с сахарозой (0,34 г на I г мозговой ткани). К суспензии постепенно добавлялся охлажденный ацетон, она выдерживалась при +4° 20 мин. и освобождалась от ацетона центрифугированием при 2000 об/мин в течение 15 мин. После двукратной обработки ацетоном проводилась однократная экстракция эфиром. Эфир удалялся под вакуумом, и антиген экстрагировался из высушенного остатка боратным буферным раствором (рН-9) в течение 24 часов при +4°. Затем суспензия центрифугировалась при 3000 об/ мин в течение 20 мин, надосадочная жидкость отсасывалась, консервировалась мертиолатом 1:50 000 и использовалась как антиген. В реакции преципитации применялись 20% или более концентрированные антигены. Концентрация антигенов выше 20% достигалась выпариванием в целлофановых мешочках (М. С. Балаян, 1961). При необходимости использовать антигены в реакции связывания комплемента их центрифугировали при 000 — 10 000 об/мин в течение 40 мин.

Для получения преципитирующих сывороток белые крысы иммунизировались трехкратно 10% вируссодержащей суспензией ткани мозга сосунков белых крыс. Дозы по 0,5 мл вводились одновременно внутрибрюшинно и внутримышечно. Интервал между первой и второй инъекциями был равен одному месяцу, а между второй и третьей — одной неделе. Кровь бралась через две недели после окончания иммунизации.

Реакция преципитации проводилась методом двойной диффузии в агаре по Ухтерлони. Использовался 1,5% агар на дистиллированной воде, который расплавлялся в кипящей водяной бане и разливался на стеклянные пластинки с бортиками. В агаре вырезались лунки, в которые помещалось по 0,05 мл ингредиентов. Инкубация проводилась при комнатной температуре во влажной камере. Результаты учитывались через 24 часа. При оценке и интерпретации результатов мы руководствовались работами Ухтерлони (1953), М. С. Балаяна (1961), Уайт и др. (1961), Л. А. Зильбера и Г. И. Абелева (1962).