Подготовка искусственной вагины требует определенной последовательности и навыка. Вначале проверяют, нет ли трещин или отверстий на цилиндре, не протекают ли краники, каково качество внутренней резиновой трубки. Убедившись, что все в порядке, на наружный цилиндр натягивают внутреннюю эластичную резиновую трубку. Для этого ее пропускают внутрь наружного цилиндра так, чтобы гладкая поверхность была обращена внутрь искусственной вагины. Затем натягивают на цилиндр концы резиновой трубки.

При этом надо следить за тем, чтобы внутренняя резиновая трубка не перекрутилась, была бы в меру натянута и просвет внутри вагины на всем протяжении был одного диаметра. Специальным ершиком моют искусственную вагину в теплом 2—3%ном содовом растворе, а затем тщательно ополаскивают чистой теплой водой, чтобы стенки внутренней трубки отмыть от содового раствора.

Вагину в течение часа просушивают на воздухе или протирают внутренние стенки ее ватным тампоном, зажатым в пинцет, или полотенцем. Затем обеззараживают внутренние стенки искусственной вагины при помощи тампона, смоченного 96%ным спиртом или 0,02%ным раствором фурацилина; можно облить кипятком.

Через патрубок при помощи воронки или резинового баллона наливают в вагину 150—180 мл воды, нагретой до 50—55°, примерно на 3Д объема вагины. Краники закрывают, и в один конец вагины вставляют стеклянный спермоприемник, который предварительно моют и обеззараживают. При использовании двухстопных спермоприемников межстенное пространство заполняют теплой водой (30—35°) и отверстие закрывают пробкой. Внутреннюю стенку вагины смазывают стерильным вазелином посредством оплавленной стеклянной палочки. Небольшой участок внутренней трубки (3—4 см до края вагины) оставляют чистым, для того чтобы предотвратить попадание вазелина в спермоприемник. Затем вагину надувают воздухом настолько, чтобы внутренняя стенка резиновой трубки на протяжении всей длины сомкнулась. У правильно подготовленной вагины отверстие получается в виде половой щели. После наполнения вагины воздухом краник закрывают, и искусственная вагина готова. Перед садкой, вставив внутрь вагины термометр, измеряют температуру. Если температура ниже 38°, то часть воды заменяют более горячей, при температуре выше 42° добавляют немного холодной воды. Обычно на станциях по искусственному осеменению приходится быстро получать сперму от многих баранов, в этих случаях заранее подготовленные вагины помещают в специальный термостат, где внутри поддерживается температура в пределах 40—42°.